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    聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒
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    產品名稱:
    聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒
    產品型號:
    產品報價:
    產品特點:
    上海哈靈生物科技有限公司生產、銷售代理各種培養基、ELISA試劑盒、生物試劑、標準品、細胞,抗體,聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒等國產/進口產品,歡迎選購!
      聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒的詳細資料:

    本頁描述的產品僅供科學實驗研究使用,不用于臨床,非醫療器械,不做其他用途。

    聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒產品簡介:

    保存:室溫(15 ℃-25℃)  干燥保存,復檢期12 個月,2 ℃-8 ℃保存時間更長。

    本試劑盒采用可以高效、專一結合DNA的硅基質材料和*的緩沖液系統,從聚丙烯酰胺凝膠上回收DNA片段,同時除去蛋白質、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質。使用本試劑盒回收的DNA可適用于后續各種常規操作,包括酶切、PCR 、測序、文庫篩選、連接和轉化等實驗。

    操作步驟: 
    *次使用前請先在15ml漂洗液中加入60ml無水乙醇,所有離心步驟均可使用臺式離心機在室溫下離心。 
    1 .將單一的目的 DNA條帶從聚丙烯酰胺凝膠中切下(盡量切除多余部分),放入 1.5ml 離心管中,稱取重量,用研磨杵將膠盡量擠壓碎。加入 2 倍體積的溶液A 吹打混勻(每 100mg 膠加入200ul 溶液A),75℃水浴30分鐘。 
    2 .用1ml 的去尖吸頭吸取混合物至過濾柱中(將膠一起吸入,溶液過多時可分次加入)。13,000rpm 離心1分鐘。將收集管中的濾出液轉入新離心管中。 
    3. 取六倍體積溶液 B 加入原離心管中(每 100mg 膠加入600ul),清洗管壁后加入過濾柱中(溶液過多時可分次加入),顛倒過濾柱或輕輕吹打幾次混勻,13,000rpm 離心1 分鐘。將所有收集的濾出液混合。 
    4 .將總濾出液混勻后加入吸附柱中(溶液過多時可分次加入),13,000rpm 離心30-60 秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放入收集管中。 
    5 .向吸附柱中加入 600μl 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),13,000rpm 離心30-60 秒,倒掉廢液,將吸附柱重新放入收集管中。
    6 .向吸附柱中加入 600μl 漂洗液,13,000rpm 離心30-60 秒,倒掉廢液。 
    7 .將離心吸附柱放回收集管中,13,000rpm 離心2 分鐘,盡量除去漂洗液。將吸附柱開蓋置于室溫 1-2 分鐘,*晾干,以防止殘留的漂洗液影響下一步的實驗。 
    8 .將吸附柱放到一個干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加適量 65–70℃預熱的洗脫緩沖液 20-30μ l ,室溫放置2 分鐘。13,000rpm 離心2 分鐘收集DNA溶液。注意:①為了增加回收效率,可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中,13,000rpm 再次離心1 分鐘。②洗脫緩沖液體積不應少于 20 μ l ,體積過小影響回收效率。③洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5 之間。
    9 .DNA回收產物直接后續實驗或者-20 ℃保存。
    注意事項:  
    1 .電泳時使用新的電泳緩沖液,以免影響電泳和回收效果。
    2 .切膠時,紫外照射時間應盡量短,以免對 DNA造成損傷。 
    3 . 本試劑盒對<50bp DNA 片段回收效率偏低(30% 左右),如要回收,應加大結合液的體積,延長吸附和洗脫的時間。 
    4 .回收率與初始DNA量和洗脫體積有關,初始量越少、洗脫體積越小,回收率越低。

    聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒產品訂購說明
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